液相色譜儀的分離系統(tǒng)由色譜柱、色譜柱的連接部件、柱恒溫裝置和固定相等組成。
一、色譜柱：
液相色譜儀的色譜柱一般用內(nèi)部拋光的不銹鋼制成，柱內(nèi)徑為1～4mm，柱長(zhǎng)為10～50cm，柱形多為直形，內(nèi)部充滿微粒固定相。近年來(lái)，由于高性能填充劑的細(xì)粒化，3～5um微粒填料的使用，趨向柱內(nèi)徑為0.8～1.5mm，柱長(zhǎng)為3～5cm，柱效為10000理論塔板數(shù)/m，所需流動(dòng)相少，并降低了柱壓要求。
二、色譜柱的連接部件：
液相色譜儀的色譜柱兩端裝有燒結(jié)不銹鋼過(guò)濾片或多孔聚四氟乙烯過(guò)濾片，阻止填料倒出或進(jìn)入檢測(cè)器，防止進(jìn)樣針頭插入固定相。
三、柱恒溫裝置：
低溫能提高分離選擇性。
適當(dāng)升高溫度有利于降低溶劑粘度，提高分離速度，降低柱壓力和改善選擇性。
常用柱溫為室溫～65℃。
四、固定相：
1、載體：
（1）表面多孔型載體：由直徑為30～40um的實(shí)心玻璃球和厚度為1～2um的多孔性外層組成。
（2）全多孔型載體：由硅膠和硅藻土等材料制成的直徑為30～50um的多孔型顆粒。
（3）全多孔型微粒載體：由納米級(jí)的硅膠微粒堆積而成，又稱堆積硅珠。載體粒度為5～10um，由于顆粒小，所以柱效高，是目前使用zui廣泛的一種載體。
2、固定液：
采用化學(xué)鍵合固定相。
3、柱填充技術(shù)：
（1）干法填充：適合直徑大于20um的填料。
（2）濕法填充：高壓勻漿填充。